Das übermäßige und stetig wachsende Interesse an der simultanen Bestimmung von Opiumalkaloiden erfordert die Entwicklung und Optimierung geeigneter Hochdurchsatzmethoden zur Bewertung des qualitativen und quantitativen Profils von Alkaloiden in Mohnstroh. Die systematische Optimierung mehrerer chromatographischer Methoden (GC/FID/MS, RP-HPLC/DAD, Si-HILIC/DAD und ZIC-HILIC/DAD) zur Trennung der wichtigsten Alkaloide (Morphin, Codein, Thebain, Oripavin, Papaverin und Noscapin) in Schlafmohnstroh (Papaver somniferum L., Papaveraceae) wurde unter Verwendung von Versuchsplänen durchgeführt. Durch die rationelle Optimierung der Methoden konnte ein Großteil überflüssiger und unproduktiver Laborforschungsarbeiten vermieden werden. Die entwickelten Methoden wurden hinsichtlich ihrer Trennleistung, Empfindlichkeit, Genauigkeit, Geschwindigkeit, Kosten, ökologischen Aspekte und Kompatibilität mit dem Extraktionsverfahren für Mohnstroh validiert und verglichen. Die vorgeschlagenen Methoden ermöglichen sowohl ein schnelles Screening als auch eine genaue Bewertung des Gehalts der Alkaloide in den Mohnproben, die aus dem Selektionsprogramm der Papaver-Stämme stammen.